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    首頁 > 培訓課程 > 生物/醫學培訓 > CRISPR/Cas9基因編輯技術(包含Base editor)專題研討會(6 月) 更新時間:2022-03-24T16:28:53

    CRISPR/Cas9基因編輯技術(包含Base editor)專題研討會(6 月)
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    CRISPR/Cas9基因編輯技術(包含Base editor)專題研討會(6 月) 已截止報名

    課程時間: 2022-06-18 08:30至 2022-06-19 17:00結束

    課程地點: 上海  詳細地址會前通知   周邊酒店預訂

    會議規模:50人

    主辦單位: 上海莫速乎教育投資有限公司 莫速乎科研教育(上海莫速乎教育投資有限公司)

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          會議通知

          會議內容 主辦方介紹


          CRISPR/Cas9基因編輯技術(包含Base editor)專題研討會(6 月)

          CRISPR/Cas9基因編輯技術(包含Base editor)專題研討會(6 月)宣傳圖

          CRISPR/Cas9基因編輯技術(包含Base editor)專題研討會

          2022年6月18~19日 ???網絡精講班

          莫速乎科研會議平臺主辦

          ??? 基因編輯技術指能夠讓人類對多個物種內的目標基因進行“精確編輯”,實現對特定DNA片段的刪除、插入、定點突變等。與傳統的TALEN和ZFN基因編輯技術相比,CRISPR/Cas9技術自問世以來,以其操作的便捷性,高效的基因編輯能力獲得青睞,成為當下科研工作者的新寵兒。目前該技術已廣泛應用于人、大鼠、小鼠、斑馬魚、果蠅、豬、水稻、小麥和擬南芥等動植物(細胞)以及細菌等微生物的基因組靶向改造,并已在功能基因組研究、疾病防治、動植物育種、動物疾病模型開發、基因治療等領域展現出巨大的應用前景。

          大量從事醫學和生命科學的研究者,都將會在自身的研究領域中用到CRISPR/Cas9基因編輯技術,但在實際操作中,由于各種原因常常遭遇技術瓶頸,因而無法順利地達成實驗目標。本次研討會將深入系統的講解CRISPR/Cas9基因編輯工具原理,操作流程,理論結合實踐,同時講解實驗操作容易遇到的問題及注意事項、解決方法,將讓大家詳細了解到具體如何利用CRISPR/Cas9技術構建基因修飾動物等。本次學習班將組建微信群與老師深入交流探討,幫助解決后續實驗過程中遇到的技術及理論問題??商崆皽蕚浜米约嚎蒲兄杏龅降膯栴},通過現場及后續的交流探討,全面掌握CRISPR/Cas9技術應用的方法及技巧,避開科研路上的彎路和陷阱,輕松成為科研達人。

          本次研討會主辦單位:

          莫速乎科研教育(上海莫速乎教育投資有限公司) 上海荊麥信息科技中心

          主講專家:

          主講專家來自中國科學院,先后參與并承擔973、863、國家自然基金課題及轉基因重大專項課題。研究領域為基因組編輯、體細胞核移植、疾病模型的建立以及胚胎發育過程中表觀遺傳學研究等。有豐富的理論和實際研究經驗。學員通過與專家直接交流,能夠分享到這些頂尖學術機構的研究經驗和實驗設計的思路。學員通過集中專題學習后能夠擴展思路,在研究技術方面領悟更多。

          課程目標:

          1、???? 掌握基因打靶與基因編輯技術(ZNF,TALENs,CRISPR/Cas9),能夠設計sgRNA靶點,構建CRISPR/Cas9質粒,用于基因敲除和敲入。

          2、???? 掌握CRISPR/Cas9質粒轉染方法, 陽性細胞克隆篩選方法體系,基因編輯細胞系的建立,基因修飾情況分析方法。

          3、???? 掌握CRISPR/Cas9脫靶產生的原因,脫靶檢測方法,降低脫靶問題的方法

          4、???? 掌握CRISPR/Cas9的實際應用,對構建基因修飾小鼠和基因修飾大動物(豬)有較深入了解。

          5、???? 掌握新基因編輯工具,如:Cpf1, C2C2, base editing等。

          6、???? 掌握基因編輯研究領域前沿進展,基因編輯工具的拓展應用、臨床應用等,形成利用基因編輯工具結合自己研究內容等科學思維。

          課程安排:(具體課程進度根據實際反饋情況進行適當調整)

          課程安排:(具體課程進度根據實際反饋情況進行適當調整)

          第一天上午8:30-11:30

          一、基因編輯技術概述

          1、轉基因與基因打靶技術

          2、基因敲除與基因敲入技術

          3、基因編輯技術的開創者——ZFNs

          4、細胞基因組DNA的修復機制

          5、第二代基因編輯技術——TALENs

          6、第三代基因編輯技術——CRISPR/Cas9

          7、基因編輯技術有多火?

          二、CRISPR/Cas9基因組編輯技術原理

          1、CRISPR/Cas系統

          ? 1.1、CRISPR/Cas系統的發現

          ? 1.2、CRISPR/Cas系統的組成

          ? 1.3、CRISPR/Cas系統的工作原理

          2、CRISPR/Cas9技術的發展及其應用

          ? 2.1、CRISPR/Cas9技術的建立

          ? 2.2、CRISPR/Cas9技術的應用

          ? 2.3、CRISPR/Cas9技術的脫靶問題

          三、Cas蛋白的選擇

          1、Cas蛋白的選擇?

          ? 1.1、Cas蛋白的分類

          ? 1.2、三種應用最廣泛的Cas蛋白

          1.3、Cas9蛋白的結構特點簡介

          1.4、Cas9蛋白與PAM序列???

          ? 1.5、Cas9的密碼子優化與NLS

          ? 1.6、如何選擇Cas蛋白?

          2、Cas蛋白資源查詢

          3、以上內容相關實驗的注意事項、實驗技巧、實驗結果講解


          第一天下午13:30-17:00


          四、CRISPR(gRNA)的設計與制備

          1、設計gRNA之前需要確定的事(編輯策略的選擇、基因結構分析及查詢方法)

          2、RNA的設計(在線互動設計演練)

          3、gRNA表達載體的構建

          3.1、gRNA的體外表達(RNP)

          3.2、gRNA細胞表達載體構建

          3.3、常見gRNA/Cas蛋白表達載體

          4、以上內容相關實驗的注意事項、實驗技巧、實驗結果講解

          五、gRNA活性檢測

          1、? Indel突變檢測的基本策略

          1.1、錯配內切酶法(EMC)

          1.2、TIDE/ICE分析法

          1.3、TA克隆法

          1.4、酶切片段長度多態性法(RFLP)

          1.5、其他方法

          2、基于胚胎的活性驗證方法

          3、以上內容相關實驗的注意事項、實驗技巧、實驗protocol、實驗結果講解


          六、基因編輯工具Cas12a(Cpf1)

          1、Cpf1的發現

          2、Cpf1與Cas9的區別

          3、Cpf1的應用案例

          4、Cpf1可同時介導多個基因的編輯


          第二天上午8:30-11:30


          七、利用CRISPR/Cas9技術創建基因組編輯細胞系

          1、目標基因的基因組組成分析

          ? 1.1 目標基因在目的細胞中的表達情況

          ? 1.2 如何確定基因的重要的功能域

          ? 1.3 可變剪接及多轉錄本

          2、基因組編輯策略設計

          ? 2.1基因敲除

          ? 2.2基因敲入

          ? 2.3定點突變

          ? 2.4大片段刪除

          3、sgRNA的設計與活性驗證

          ? 3.1 如何選擇位置合適的gRNA?

          4、用于基因敲入的供體DNA的設計

          ? 4.1 Donor DNA的形式

          ? 4.2 使用ssODN作為Donor

          ? 4.3 設計ssODN的要點

          ? 4.4 插入位點與DSB位點一致的情況

          ? 4.5 插入位點與DSB位點不一致的情況

          5、質粒(和/或供體)導入細胞系的方法(脂質體轉染,電轉,病毒轉導)

          6、陽性克隆篩選

          ? 6.1 抗生素篩選(Protocol)

          ? 6.2 挑單細胞克?。≒rotocol)

          ? 6.3 基因型鑒定

          6.4 根據打靶效率估算需要篩選的克隆數量

          ? 6.5 有限稀釋法稀釋細胞的流程(Protocol)

          ??6.6 基因型鑒定

          7、基因組編輯細胞系的建立

          8、提高基因敲入(同源重組)效率的策略

          9、以上內容相關實驗的注意事項、實驗技巧、實驗protocol、實驗結果講解


          八、CRISPR/Cas系統介導的基因編輯案例介紹

          1、CRISPR常規工作流程

          2、Knock-out案例1

          3、Knock-out案例2

          4、Knock-in案例


          第二天下午13:30-17:00


          九、利用CRISPR技術創建基因組編輯動物

          1、CRISPR/Cas方法與傳統方法的比較

          2、基因編輯動物制備流程

          3、通過顯微注射法制備基因編輯小鼠

          3.1、小鼠的超排和顯微注射

          3.2、胚胎移植和基因型鑒定

          3.3、顯微注射法獲得的基因編輯動物的鑒定

          4、通過體細胞克隆法制備基因編輯動物

          ? 4.1、供體細胞分離、培養

          ? 4.2、供體細胞的基因編輯

          ? 4.3、體細胞核移植操作

          ? 4.4、胚胎移植

          ? 4.5、基因編輯個體的鑒定和擴繁


          十、CRISPR轉錄抑制/轉錄激活以及CRISPR screen

          1、dCas9的特征簡介

          2、運用CRISPR技術進行轉錄調控的原理

          3、CRISPR轉錄抑制/轉錄激活技術及優化

          4、CRISPRoff

          5、CRISPR screen及CRISPRa/i screen(高通量篩選)


          十一、單堿基編輯與單堿基編輯器(CBE、ABE、PE)

          1、? 單堿基編輯器的原理

          2、? 單堿基編輯器的優化

          3、? 先導編輯技術原理及其應用


          十二、基因編輯技術的脫靶問題

          1、? 脫靶產生的原因

          2、? 基因編輯工具的脫靶風險

          3、? 脫靶檢測方法

          4、? 如何降低脫靶?


          十三、Cas12和Cas13蛋白及其應用

          1、? Cas12和Cas13與Cas9的差異

          2、? Cas13特點及其在核酸檢測中的應用

          3、? SHERLOCK及DETECTR系統原理


          十四、基因編輯技術相關資源

          介紹CRISPR/Cas系統以及基因編輯相關的質粒、gRNA、文庫、細胞、Protocol以及技術blog等資源。



          會務信息

          時間地點:

          2022/6/18-19? ?網絡精講班

          3200元/人 ?注冊費包含網絡直播平臺費、專家講課費及視頻課程的費用。注冊費用

          主辦單位:莫速乎教育(上海莫速乎教育投資有限公司)、上海荊麥信息科技中心



          其他須知:

          1、 請自備筆記本電腦。請確保電腦安裝的是WINDOWS的操作系統

          2、 所用軟件會前兩天發到微信群,請下載安裝。

          3、 會議期間寄送經蓋章的紙質邀請函、發票供報銷使用。

          4、 報名后會微信發送給您更詳細的參會須知和電子版邀請函。


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          上海莫速乎教育投資有限公司 上海莫速乎教育投資有限公司

          莫速乎科研教育,簡稱莫速乎,原名“多圈課堂”,創立于2012年12月,隸屬于上海莫速乎教育投資有限公司。2014年3月更名為“莫速乎科研教育”,品牌名源于我國古代著名教育家《荀子·勸學》“學之經 莫速乎”。莫速乎旨在通過獨創的EAT理念打造最易接收并最能提高實際技能的高清視頻課程,以作為科研傳統教育的補充或替代。同時將持續開展現場研討班,以彌補視頻課程之不足。EAT理念以荀子思想為根基,并從“學”的角度優化教學,且課程策劃符合哲學的認識論規律,是目前“最符合人性”的教學理念。在課程策劃方面,我們堅信每個小領域只需要一部課程,一部優秀的課程,經典的課程,足可供全國千百萬人學習,莫速乎正是立志于打造每個小領域內的這一部課程。

          莫速乎科研教育(上海莫速乎教育投資有限公司) 莫速乎科研教育(上海莫速乎教育投資有限公司)

          莫速乎科研教育,簡稱莫速乎,原名“多圈課堂”,創立于2012年12月,隸屬于上海莫速乎教育投資有限公司。2014年3月更名為“莫速乎科研教育”,品牌名源于我國古代著名教育家《荀子·勸學》“學之經 莫速乎”。莫速乎旨在通過獨創的EAT理念打造最易接收并最能提高實際技能的高清視頻課程,以作為科研傳統教育的補充或替代。同時將持續開展現場研討班,以彌補視頻課程之不足。EAT理念以荀子思想為根基,并從“學”的角度優化教學,且課程策劃符合哲學的認識論規律,是目前“最符合人性”的教學理念。在課程策劃方面,我們堅信每個小領域只需要一部課程,一部優秀的課程,經典的課程,足可供全國千百萬人學習,莫速乎正是立志于打造每個小領域內的這一部課程。

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          標簽: 基因編輯

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